WE0201 血清血漿尿液游離RNA提取試劑

血清血漿尿液游離RNA提取試劑由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要血清血漿尿液游離RNA提取試劑等RNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括血清血漿尿液游離RNA提取試劑在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：血清血漿尿液游離RNA提取試劑
英文名稱：RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent
產(chǎn)品貨號(hào)：WE0201
產(chǎn)品規(guī)格：50ml

  本品特別適用于從血清、血漿中分離純化包括microRNA和其他小RNA(<200nt)在內(nèi)的總RNA。本品靈活處理不同起始量的樣品，在有效裂解樣本的同時(shí)，可有效保存RNA的完整性，提取的總RNA完整性好，無(wú)蛋白和DNA污染，提取的RNA可用于RT-PCR、Northern Blot和分子克隆等下游實(shí)驗(yàn)。

自備試劑：氯f(wàn)ǎng、異丙醇、75%乙醇、無(wú)RNase的水(新開(kāi)封或提取RNA專用)。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng)：
1、預(yù)防RNase污染，應(yīng)注意以下幾方面：
① 使用無(wú)RNase的塑料制品和槍頭，避免交叉污染。
② 玻璃器皿應(yīng)在使用前于180℃高溫下干烤4小時(shí)，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分鐘，用水徹底沖洗后高壓滅菌。
③ 配制溶液應(yīng)使用無(wú)RNase的水。
④ 操作人員戴一次性口罩和手套，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要勤換手套。
2、提取的樣品避免反復(fù)凍融，否則影響RNA提取得率和質(zhì)量。
3、本品中含有苯酚，具有毒性和腐蝕性。如果吸入體內(nèi)、接觸皮膚、吞食等會(huì)導(dǎo)致中毒、灼傷以及其他身體傷害。使用本制品時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)物品，如防護(hù)服裝、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接觸到眼睛，應(yīng)立即用大量的水沖洗并前往醫(yī)院治療。
4、樣品用游離RNA(血清血漿尿液)提取試劑勻漿后，如不即刻加入氯f(wàn)ǎng，置于-70℃可放置一個(gè)月以上。
5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2～8℃可以保存一周，-20℃條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短，容易降解，建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，如反轉(zhuǎn)錄成cDNA，Northern Blot等。
6、若下游實(shí)驗(yàn)對(duì)DNA非常敏感，建議用不含RNase的DNase I(貨號(hào)：WE0213)對(duì)RNA進(jìn)行處理。

操作步驟：
1、取200μl新鮮或者凍存的血清或血漿，加入3倍體積的游離RNA(血清血漿尿液)提取試劑。振蕩30秒，充分混勻。
注意：樣本加入游離RNA(血清血漿尿液)提取試劑后，可能會(huì)出現(xiàn)沉淀，經(jīng)過(guò)振蕩混勻后，沉淀基本消失。若仍有少量沉淀，不影響下游實(shí)驗(yàn)，可繼續(xù)操作。
2、將處理后的樣品在室溫放置5分鐘，使蛋白核酸復(fù)合物完全分離。
3、向以上溶液中加入氯f(wàn)ǎng，每使用1ml血清/血漿樣本專用總RNA提取試劑加入0.2ml氯f(wàn)ǎng，蓋好管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫放置2-3分鐘。
注意：如不能渦旋混勻，可手動(dòng)快速顛倒混勻2分鐘。
4、4℃ 12000rpm離心20分鐘，此時(shí)樣品分成三層：紅色有機(jī)相，中間層和上層無(wú)色水相，RNA 主要在水相中，把水相轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的無(wú)RNase的離心管(自備)中。
5、在得到的水相溶液中加入等體積異丙醇，顛倒混勻，室溫放置30分鐘。或-20℃沉淀過(guò)夜，效果更佳。
6、4℃ 12000rpm 離心20分鐘，棄上清。
注意：離心前RNA沉淀經(jīng)常是看不見(jiàn)的，離心后在管側(cè)和管底形成膠狀沉淀。
7、加入75%乙醇(用無(wú)RNase的水配制)洗滌沉淀。每使用1ml游離RNA(血清血漿尿液)提取試劑加入1ml 75%乙醇對(duì)沉淀進(jìn)行洗滌。
8、4℃ 12000rpm離心3分鐘，小心吸棄上清，注意不要吸棄RNA沉淀。
注意：剩余的少量液體可短暫離心，然后用槍頭吸出，注意不要吸棄沉淀。
9、室溫放置2-3分鐘，晾干。加入30-100μl無(wú)RNase的水，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。
注意：沉淀不要過(guò)分干燥，以免難于溶解。

儲(chǔ)存條件：2～8℃。

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