SYA290 牛源性成分單重熒光PCR檢測試劑
產品簡介
北京百奧萊博供應的牛源性成分單重熒光PCR檢測試劑僅用于生物化學研究方面,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多牛源性成分單重熒光PCR檢測試劑等物種PCR檢測試劑盒產品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括牛源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:牛源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒
產品貨號:SYA290
產品規(guī)格:48次/盒
一、簡介
本試劑盒用一對牛源性成分特異性引物,結合一條特異性熒光探針,用熒光PCR技術對牛源性成分DNA進行體外擴增檢測。本試劑盒中牛源性成分的探針報告基團為FAM。
二、用途
該試劑盒適合于各種飼料及其它樣品中牛源性成分的檢測。
三、試劑盒組成(48T)
組成成分 數(shù)量 規(guī)格
牛物種熒光qPCR反應液(Bos-qPCR MIX) 1管 600μL/管
陰性對照(NTC) 1管 50μL/管
陽性對照(Bos-PTC) 1管 50μL/管
四、儲存條件及有效期
本試劑盒于-20℃以下保存,有效期為6個月。
五、熒光PCR儀器適用范圍
ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等熒光定量PCR檢測儀等。
六、樣品采集與DNA提取
6.1 樣品采集
樣品的采集按照標準《飼料中牛羊源性成分的定性檢測定性聚合酶鏈式反應(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求進行。
6.2 DNA提取
可采購北京百奧萊博科技有限公司生產的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
注:陽性對照和陰性對照為已經抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
七、檢測步驟:
7.1 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(Bos-qPCR MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 15μL N×15μL
向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品/陰性對照(NTC)/陽性對照(Bos-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入實時熒光PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM,淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX 參比熒光。
八、結果分析
8.1 結果分析條件設定
直接讀取檢測結果?;€和閾值設定原則根據(jù)儀器噪聲情況進行調整,以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴增曲線的zuì高點為準。
8.2 試驗成立判定
(1) 陰性對照(NTC):不應產生任何的擴增曲線。
(2) 陽性對照(Bos-PTC):均產生擴增曲線。
(3) 以上條件應同時滿足,否則,此次試驗視為無效。
8.3 結果判定
(1) 在試驗成立的條件下,Ct值≤35的樣本為陽性,表明牛源性成分核酸陽性。
(2) Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本,表明牛源性成分核酸陰性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判為可疑樣品。對于可疑樣品,先看擴增曲線。如果擴增曲線為對數(shù)擴增曲線,則為可疑陽性,否則判為陰性。
(4) 對于可疑陽性樣品,重新抽提核酸,再次進行牛源性成分qPCR檢測。如果重復擴增曲線為對數(shù)擴增曲線,判為樣本陽性,表明牛源性成分核酸陽性;否則判為樣本陰性。
九、注意事項:
(1) 初次使用前請仔細閱讀說明書。并嚴格按照說明書步驟操作。
(2) 所有使用的離心管應高壓滅菌,而且必須不含DNA酶。
(3) PCR操作應嚴格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)等),防止實驗室污染。
(4) 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺進行,以免污染。
(5) 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。
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一、簡介
本試劑盒用一對鴨源性成分特異性引物,結合一條特異性熒光探針,用熒光PCR技術對鴨源性成分DNA進行體外擴增檢測。本試劑盒中鴨源性成分的探針報告基團為FAM。
二、用途
該試劑盒適合于各種飼料及其它樣品中鴨源性成分的檢測。
三、試劑盒組成(48T)
組成成分 數(shù)量 規(guī)格
鴨物種熒光qPCR反應液(Duck-qPCR MIX) 1管 720μL/管
陰性對照(NTC) 1管 50μL/管
陽性對照(Duck-PTC) 1管 50μL/管
四、儲存條件及有效期
本試劑盒于-20℃以下保存,有效期為6個月。
五、熒光PCR儀器適用范圍:
ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等熒光定量PCR檢測儀等。
六、樣品采集與DNA提取
6.1 樣品采集
樣品的采集按照標準《飼料中牛羊源性成分的定性檢測定性聚合酶鏈式反應(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求進行。
6.2 DNA提取
可采購北京百奧萊博科技有限公司生產的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
注:陽性對照和陰性對照為已經抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
七、檢測步驟:
7.1 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(Duck-qPCR MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 15μL N×15μL
向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品/陰性對照(NTC)/陽性對照(Duck-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入實時熒光PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM,淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
八、結果分析
8.1 結果分析條件設定
直接讀取檢測結果。基線和閾值設定原則根據(jù)儀器噪聲情況進行調整,以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴增曲線的zuì高點為準。
8.2 試驗成立判定
(1) 陰性對照(NTC):不應產生任何的擴增曲線。
(2) 陽性對照(Duck-PTC):均產生擴增曲線。
(3) 以上條件應同時滿足,否則,此次試驗視為無效。
8.3 結果判定
(1) 在試驗成立的條件下,Ct值≤35的樣本為陽性,表明鴨源性成分核酸陽性。
(2) Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本,表明鴨源性成分核酸陰性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判為可疑樣品。對于可疑樣品,先看擴增曲線。如果擴增曲線為對數(shù)擴增曲線,則為可疑陽性,否則判為陰性。
(4) 對于可疑陽性樣品,重新抽提核酸,再次進行鴨源性成分qPCR檢測。如果重復擴增曲線為對數(shù)擴增曲線,判為樣本陽性,表明鴨源性成分核酸陽性;否則判為樣本陰性。
九、注意事項:
(1) 初次使用前請仔細閱讀說明書。并嚴格按照說明書步驟操作。
(2) 所有使用的離心管應高壓滅菌,而且必須不含DNA酶。
(3) PCR操作應嚴格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)等),防止實驗室污染。
(4) 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺進行,以免污染。
(5) 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。
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