SY0087 EGR1-Luc熒光素酶報告基因

EGR1-Luc熒光素酶報告基因由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，我公司的EGR1-Luc熒光素酶報告基因品質上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括EGR1-Luc熒光素酶報告基因質粒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱：EGR1-Luc熒光素酶報告基因質粒
英文名稱：EGR1 luciferase reporter plasmid
產品貨號：SY0087
產品規(guī)格：1μg

EGR1熒光素酶報告基因（報告基因質粒）（EGR1 luciferase reporter plasimd）是用于檢測EGR1轉錄活性水平為目的的報告基因。早期生長反應基因1(early growth response gene 1 , EGR1) 為早期生長反應基因家族重要成員，其蛋白產物是一個59KD的鋅指樣轉錄因子。EGR1的目的基因是分化和有絲分裂所必須的。

ERG1報告基因主要檢測細胞中ERG1的活性、藥物研究以及基因過表達和RNAi的表型分析等。

pGMEGR1-Lu是我公司改造后的哺乳動物真核表達載體，在其多克隆位點插入了多個EGR1結合位點，可以高靈敏度地檢測EGR1的激活水平。同時，對載體中預測出的其它轉錄因子以外的結合位點進行了適當?shù)耐蛔?，增加了質粒的轉錄因子結合特異性。由于質粒體積減小，使得EGR1報告基因質粒更易于轉染。

質粒圖譜



注意事項
本質粒未經(jīng)我公司允許不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人實驗室以外的任何人或單位。
為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。

使用說明
pGMEGR1-Lu可以采用常規(guī)轉染方法轉染哺乳動物細胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進行檢測。

儲存條件：-20℃。

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名稱：螢光素酶報告基因檢測試劑盒(海腎)
貨號：YT272
規(guī)格：100次|1000次
本試劑盒是一種以腸腔素為底物來檢測海腎螢光素酶，簡稱renilla luciferase活性的試劑盒。

海腎螢光素酶是一種分子量約為36kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的過程中，會發(fā)出生物螢光。生物螢光可以通過化學發(fā)光儀或液閃測定儀進行測定。本試劑盒的檢測原理參考下圖。


海腎螢光素酶的檢測原理圖。

通過螢光素和螢光素酶這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉錄調控元件或5’啟動子區(qū)克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR區(qū)克隆在luciferase的下游等，構建成報告基因質粒。然后轉染細胞，用適當藥物等處理細胞后裂解細胞，測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。海腎螢光素酶一方面常用作螢火蟲螢光素酶報告基因檢測的內參，以消除由于質粒的轉染效率不同而帶來的誤差；另一方面海腎螢光素酶也可以和螢火蟲螢光素酶一樣被用于常規(guī)的報告基因檢測。海腎螢光素酶催化Coelenterazine發(fā)光的zuì強發(fā)光波長為465nm。

注意事項：
1. 為取得zuì佳測定效果，在用單管的化學發(fā)光儀測定時，樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制在相同時間內，例如30秒內；使用具有化學發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標儀時，宜先把樣品全部加好，然后統(tǒng)一加入海腎螢光素酶檢測工作液。
2. 由于溫度對酶反應有影響，所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
3. 樣品和測定試劑混合后，必須等待1-2秒，再進行測定。測定時間通常為10秒，根據(jù)情況也可以測定更長或更短時間，但是同一批樣品宜使用相同的測定時間。
4. 海腎螢光素酶檢測底物(100×)配制在無水乙醇中。由于無水乙醇容易揮發(fā)，有時會在初次使用時發(fā)現(xiàn)體積明顯小于100μl的情況，此時用無水乙醇把體積補足至100μl，并混勻后即可使用。
5. 海腎螢光素酶檢測工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。隨著保存時間的延長檢測效果會不斷下降，因此不可配制成工作液后長期保存。
6. 為避免由于質粒轉染細胞時效率的差異而帶來的誤差，可以同時轉入適當?shù)奈灮鹣x螢光素酶的報告基因質粒作為內參，采用百奧萊博的雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(YT272)進行檢測；也可以同時轉入β-半乳糖苷酶報告基因質粒作為內參，然后采用百奧萊博的β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(YT274)進行檢測。采用本試劑盒中的報告基因細胞裂解液裂解獲得的樣品可以直接用于β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(YT274)的檢測。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

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