BTN80403 RNAse-free水

RNAse-free水由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研試驗，我公司專注于RNA提取純化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的RNAse-free水質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括RNAse-free水在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：RNAse-free水
英文名稱：RNase-free Water
產(chǎn)品貨號：BTN80403
產(chǎn)品規(guī)格：1mL

本產(chǎn)品就是DEPC處理過的水，但是經(jīng)過RNase-free質(zhì)檢，所以沒有RNase污染?？梢杂糜谂cRNA相關(guān)的實驗。

儲存條件：常溫運輸及保存、有效期一年。

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名稱：昆蟲RNA柱式提取試劑盒
貨號：BTN81220
規(guī)格：50次
本試劑盒是專門用于從富含多糖、糖蛋白、粘蛋白的動物樣品(尤其是昆蟲樣品)中提取總RNA的試劑。

試劑盒特點：
1. 操作簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。
2. RNA純度高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。
3.適用于各種昆蟲組織，每100mg組織能提取到20-30μg 總RNA。
4. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實驗。
5.一站式，提供RNase-free的樣品收集管。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脫液	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸，4℃保存(RNA洗脫液zuì好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 將50-300mg昆蟲組織放入10-15mL塑料離心管中，加入1mL溶液A，然后用勻漿器勻漿5-20秒。勻漿時會產(chǎn)生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織，硯磨完后加入1mL溶液A。
注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
2. 將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。
3.在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備lǜ仿，在振蕩器上振蕩30秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
4.室溫12000 rmp離心3～5分鐘，兩相間將有約5-10毫米厚的細(xì)胞破碎物。
5. 將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，下層有機相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，避免觸及或吸取。zuì好留下100μl上清液不取。
6. 加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。
7. 將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12000 rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。
8. 將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，12000 rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 加0.7mL通用洗柱液，室溫12000 rmp離心半分鐘，棄穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液，室溫12000 rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。
11.室溫12000 rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中，加入50-100μl RNA洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
13. 12000 rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。注意：大部分昆蟲的28S RNA被切割成兩個小的片段，彼此用氫鍵相連，所以在甲醛變性膠中，沒有28S帶出現(xiàn)(文獻(xiàn)見：Eva C. Winnebeck，Craig D. Millar and Guy R. Warman，Why does insect RNA look degraded? Journal of Insect Science: Vol. 10：1-7)
15. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5-10μl RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進(jìn)而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。
16. RNA純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。

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