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生物樣品的采集制備和預(yù)處理

發(fā)布時間:2017-11-08瀏覽次數(shù):1118返回列表

一、生物樣品采集 

1、植物樣品的采集 

( 1 )采集的植物樣品要具有代表性、典型性、適時性。 

( 2 )布點(diǎn)方法 

常采用梅花形五點(diǎn)取樣法或交叉間隔取樣法。 

( 3 )采樣方法 

①采樣前應(yīng)預(yù)先準(zhǔn)備好采樣工具。 

②根據(jù)實際情況確定樣品采樣量。 

③選擇種植物在采樣區(qū)內(nèi)按梅花形五點(diǎn)或交叉間隔取樣方式采集 5 - 10 處的植株混合組成一個代表樣品。 

④將采好的樣品裝入布口袋或聚乙烯塑料袋中,貼好標(biāo)簽,并填寫采樣登記表。 

2、動物樣品的采集 

( 1 )尿的采集 

定性檢測尿液成分時應(yīng)采集晨尿。 

定量檢測尿液成分時一般采集 24h 總排尿量。 

( 2 )血液的采集 

一般用注射器抽取 10mL 血樣冷藏備用。常用于分析血液中所含金屬毒物及非金屬毒物。 

( 3 )毛發(fā)和指甲的采集 

采集和保存較為方便,主要用于汞、砷等含量的測定。 

( 4 )組織和臟器采集 

二、生物樣品的制備 

對于液體狀態(tài)的動物樣品常無需制備,對動物組織和臟器主要是采用搗碎的方法制成漿狀鮮樣備用,而對植物樣常根據(jù)不同情況,利用不同方式進(jìn)行樣品制備。 

植物樣品的制備 

(一)平均樣的獲得 

四分法、切成塊的 1/4 - 1/8 混合 

(二)分析試樣的制備 

1 、鮮樣 

2 、風(fēng)干樣: 60 - 70 攝氏度低溫真空干燥箱中烘干(勻漿、小片) 

3 、水分含量測定( 100 - 105 攝氏度烘干 / 真空干燥 / 低溫烘干) 

三、生物樣品的預(yù)處理 

常用的預(yù)處理方法有濕法消解法、灰化法、提取、分離和濃縮法等。 

1、濕化消解法 

利用強(qiáng)酸等與生物樣品共同煮沸,將樣品中有機(jī)物分解成二氧化碳和水除去。 

常用的消解試劑體系有濃硝酸-高氯酸、濃硝酸-濃硫酸、濃硫酸-過氧化氫等。 

2、灰化法 

利用坩堝或氧燃燒ping,使樣品在高溫條件下分解,并用適當(dāng)?shù)娜芤喝芙饣蛭辗纸猱a(chǎn)物,制成分析試液。 

3、提取法 

整個過程包括提取、分離、濃縮三個步驟。 

( 1 )提取 

應(yīng)根據(jù)樣品的特點(diǎn)、待測組分的性質(zhì)、存在形態(tài)和數(shù)量、以及分析方法等因素選擇,常用方法有: 

1 、振蕩提取法 

2 、組織搗碎提取法 

3 、脂肪提取器提取 

4 、直接球磨提取法 

( 2 )分離 

用提取劑從生物樣品中提取欲測組分的同時,不可避免的會將其他相關(guān)組分提取出來,因此,在測定之前,還必須將上述雜質(zhì)分離出去。常用的分離方法有:液-液萃取法、層析法、磺化法、低溫冷凍法、吹蒸法、液上空間法等。 

( 3 )濃縮 

當(dāng)生物樣品的提取液經(jīng)過分離凈化后,其中的污染物濃度往往仍達(dá)不到分析方法的要求,需要進(jìn)行濃縮和富集,常用方法有:蒸餾或減壓蒸餾法、 K-D 濃縮器濃縮法、蒸發(fā)法、真空冷凍干燥法等。