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人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒實驗原理

發(fā)布時間:2018-05-29瀏覽次數(shù):2067返回列表



中文名:人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒使用說明
英文簡稱:Human α1-microglobulin,α1-MG ELISA kit
供應(yīng)商:上海樊克
規(guī)格:48T , 96T
存儲條件: 頻繁使用時(2-8攝氏度),較長時間儲存時(-20攝氏度)
有效期:2-8攝氏度2周,-20攝氏度 存放6個月
使用范圍:本產(chǎn)品僅科研實驗,嚴禁用于臨床使用



檢測中樣品的處理:
1.細胞培養(yǎng)物上清:細胞培養(yǎng)物于室溫1000g,離心10分鐘后收集上清,并將標本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血清:標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4.尿液:無菌收集取初尿,離心除去沉淀物,即可用于檢測,要長期保存尿樣,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱長期保存。
5.組織勻漿:將組織標本先用PBS洗滌,除去多余血液,勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜,再經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜,5000g,4℃離心5分鐘,取上清即可檢測。注:取樣和樣品處理過程中,防止有毒物質(zhì)對操作人員的危害,要采取相應(yīng)的保護措施。



 使用原理:
1,ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2,結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
3,在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
4,用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。
5,此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
6,由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。




注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。