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過濾小妙招 | 掌握這些過濾技巧,至少能讓實驗效率提高一倍

發(fā)布時間:2018-09-05瀏覽次數(shù):1521返回列表

過濾應(yīng)該是實驗室中非常常見的實驗,進入實驗室后必須掌握的基礎(chǔ)技能。特別是做一些分析型的檢測實驗,一般都會進行稀釋和過濾。然而根據(jù)樣品量多量少的不同,需要選擇不同的過濾裝置。


可能很多小伙伴在做實驗時,只是按部就班,師兄師姐讓怎么做就怎么做,也沒有思考太多原因為什么要那樣做。那么,今天我們就來系統(tǒng)地說說過濾的一些小妙招,知道這些,興許還會顛覆你之前的實驗,至少還能讓實驗效率提高一倍呢。


那么,先來說說針對小量樣品的過濾。

01

一次性針頭式過濾器




一次性針頭式過濾器與一次性注射器配套使用,可組裝成一個簡易的過濾裝置,適用于液體量小的過濾,量大或者不溶物過多會導(dǎo)致堵塞,主要應(yīng)用于樣品的預(yù)濾,實驗室生物流體、培養(yǎng)基和媒介添加劑的除菌過濾。


02

millipore 超濾離心管



蛋白濃縮和換 Buffer 通常使用超濾離心管,有多種品牌,但是zui常用的要屬 Millipore 品牌。Millipore 有多種型號的供選擇,選擇合適的超濾管,主要視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定。

剛做實驗的人員肯定會好奇到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、5kDa、還是 30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的 1/3,比如目的蛋白分子量為 35kDa,就可以選擇 10kDa 截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為 10kD 左右,則可以用截留分子量 3kD 的超濾管。使用時,需要將超濾離心管放在離心機中,一定要注意質(zhì)量和重心二者都要達到平衡,且轉(zhuǎn)速不可太快,否則直接損壞超濾膜。超濾管是可重復(fù)使用的,使用一次就扔掉確實太浪費;但也不會使用太多次,一般也就用一兩次就換新的。

保存時要特別注意,將超濾離心管的超濾膜泡在疊氮鈉溶液或 20% 的乙醇溶液中,防止長菌,而且防干,只要超濾膜浸了水,就不可以再讓它干,否則超濾膜的分子結(jié)構(gòu)就變了。切記不可以用超聲洗滌。


接下來,要講的是針對大量樣品的過濾:一般是濾膜與濾杯配套使用。


03

微孔濾膜



一次性針頭式過濾器雖然方便,但是只能過濾少量樣品。當(dāng)需要大量過濾時,可以選擇微孔濾膜結(jié)合進行濾杯過濾。微孔濾膜主要用于樣品分析特別是色譜分析中流動相及樣品的過濾,對保護色譜柱及輸液泵管路系統(tǒng)和進樣閥等不被污染具有良好的作用。

目前已廣泛應(yīng)用在重量分析、微量分析、膠體分離及無菌實驗中。與一次性針頭式過濾器一樣,膜的直徑分別有 47、50 mm,其孔徑分為 0.22、0.45 μm,同樣分為有機系和水系,過濾樣品時根據(jù)液體的性質(zhì)對應(yīng)選擇。



04

攪拌式超濾杯



在操作大體積樣本時,Millipore 標(biāo)準(zhǔn)的 Amicon Ultra 超濾管(0.5/2/4/15mL)已經(jīng)明顯不能滿足需求,這時超濾杯就非常必要了。Amicon 攪拌式超濾杯方便好用,功能非常強大。比一代超濾杯設(shè)計更加符合人體工程學(xué),組裝、拆卸以及開關(guān)都為方便。

配套膜片選擇更廣,包括超濾膜和微濾膜以及您自選的膜片??蛇M行溫和濃縮、脫鹽、換液,更適合大體積病毒、外泌體/囊泡、蛋白溶液等樣品,同時,提供操作視頻和中文指南,技術(shù)支持完備。另外,多種容量可選:50mL,200mL 和 400mL,根據(jù)實驗需要選擇。


05

真空過濾器



一次性真空式過濾器由透明高分子材料聚苯乙烯(GPPS)制成,利用真空泵提供壓力差,用于組織培養(yǎng)液和其他實驗室流體溶液的大量過濾,樣品處理量可達數(shù)升,過濾后的樣品可直接以無菌的收集瓶保存。4 種上杯的過濾膜類型可選:MCE、尼龍、PVDF 和 PES。膜孔徑范圍:0.10μm,0.22μm,0.45μm;外置有一個抽真空小孔,可一次性快速過濾大量實驗流體。

過濾裝置穩(wěn)定,重心低,可防止樣品濺出。易讀取標(biāo)志顯示濾過容量。運輸過程中,優(yōu)質(zhì)防塵塑料密封式袋子單個內(nèi)裝,不易污染。另外,可配有單獨的過濾器上杯和收集瓶,以供不同實驗要求選用。


06

濾杯



這款濾杯可直接接藍蓋瓶,可反復(fù)使用。不需用抽濾瓶,接上真空泵可直接使用。收集瓶帶有刻度,濾過液可直接保存于收集瓶??筛邏簻缇貜?fù)使用,更經(jīng)濟劃算。適用濾膜直徑為 47 毫米。使用時,過濾樣品無需單獨清洗,有機溶液殘留會揮發(fā)掉,水溶液也會自行蒸發(fā)干。


07

多聯(lián)過濾器



多聯(lián)過濾器專為多個樣品同時過濾而設(shè)計制造。目前,實驗室在對溶液進行過濾時,一般采用玻璃材質(zhì)砂芯過濾裝置,這種方法每次只能過濾一個樣品,過濾速度慢,效率低,人工勞動強度大。對于需要同時過濾多個樣品的操作者,選擇使用多聯(lián)過濾器更為方便。由于它的每一個過濾架均有的控制閥門,因此僅需用一個真空泵便可支持單聯(lián)或多聯(lián)同時操作。全不銹鋼材質(zhì)的多聯(lián)過濾器支架可在 180℃ 的高溫下進行過濾操作;鋁合金夾子設(shè)計合理緊密,可以方便地將濾杯與中間過濾頭合在一起并保證嚴(yán)格密封而不會漏液。同時,316L 衛(wèi)生級不銹鋼材質(zhì)耐酸堿,耐腐蝕,易于高溫消毒,使分析結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。