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常用細(xì)菌培養(yǎng)基制備及注意事項
發(fā)布時間:2021-04-08瀏覽次數(shù):1015返回列表
實驗方法原理 培養(yǎng)基是人工合成的一種混合營養(yǎng)料,用于分離培養(yǎng)細(xì)菌。常用的有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基等。
試劑、試劑盒
牛肉膏 蛋白胨 氯化鈉 蒸餾水 瓊脂 NaOH 酚紅指示劑
儀器、耗材
pH 試紙 三角燒瓶 量筒 天平 吸管
實驗步驟
1. 稱取牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,氯化鈉5 g 加入1 000 ml 蒸餾水中,加熱溶化。
2. 待冷至40-50℃時,測定并矯正酸堿度為pH7.6。通常未矯正前的肉膏湯均呈酸性,故常用1/10 M NaOH 溶液進(jìn)行矯正。
3. 酸堿度調(diào)整后,煮沸3-5 分鐘,補(bǔ)足因蒸發(fā)失去的水量,待冷卻后用濾紙使之過濾澄清。并重新測定酸堿度一次,若變動較大,應(yīng)再進(jìn)行矯正。
4. 按應(yīng)用時的需要量分裝于適當(dāng)?shù)脑嚬芑驘績?nèi),塞上硅膠塞并用牛皮紙包扎,置高壓蒸汽滅菌器內(nèi),經(jīng)103.4 kpa、121.3℃、20 分鐘滅菌。
5. 滅菌后取出培養(yǎng)基,待冷至40℃以下時,放入37℃溫箱24 小時做無菌試驗,如無菌生長,即可備用