細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法是判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素是否符合規(guī)定。 內(nèi)毒素(Endotoxin)即革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖，其毒性成分為類脂A。菌體死亡崩解后釋放出來(lái)。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查包括兩種方法，即凝膠法和光度測(cè)定法，后者包括濁度法和顯色基質(zhì)法。供試品檢測(cè)時(shí)，可使用其中任何一種方法進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)測(cè)定結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，除另有規(guī)定外，以凝膠法結(jié)果為準(zhǔn)。

  熱原主要是細(xì)菌釋放的一種內(nèi)毒素，熱原進(jìn)入機(jī)體血液循環(huán)系統(tǒng)會(huì)引起發(fā)熱等一系列不良反應(yīng)，因此，注射劑熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素檢查是保證注射劑安全性的重要質(zhì)量指標(biāo)。

  異常結(jié)果：臨床上在進(jìn)行靜脈滴注大量輸液時(shí)，由于藥液中含有熱原，病人在0.5-1h內(nèi)出現(xiàn)冷顫、高熱、出汗、昏暈、嘔吐等癥狀，高熱時(shí)體溫可達(dá)40℃，嚴(yán)重者甚至可休克。

  在細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法的建立中，計(jì)算內(nèi)毒素限值L、MVD和MVC時(shí)，需要注意大人用劑量、產(chǎn)品規(guī)格、鱟試劑的靈敏度等重要的參數(shù)，因?yàn)橛?jì)算錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致后續(xù)的所有努力均告失敗。常見(jiàn)的問(wèn)題有：

  (1)臨床用藥劑量確定不正確，僅用常規(guī)用藥劑量，未考慮臨床可能的人體大用藥劑量和給藥途徑，在限值計(jì)算公式L=K/M中，由于對(duì)K值及M值的定義模糊，使K值及M值賦值不準(zhǔn)確，終導(dǎo)致限值計(jì)算錯(cuò)誤。例如，某注射劑臨床成人每次靜脈滴注給藥40-80mg，嬰兒(三個(gè)月以上)靜脈滴注給藥每次10-20mg。按成人(體重60kg)劑量計(jì)算限值為3.75EU/mg，而嬰兒體重僅為5kg左右，計(jì)算限值約為1.25EU/mg，如果不考慮臨床每公斤體重大用藥劑量，細(xì)菌內(nèi)毒素限值就會(huì)出現(xiàn)較大的差別。

  (2)有的申報(bào)品種細(xì)菌內(nèi)毒素限值不是根據(jù)臨床用量計(jì)算出來(lái)，而是根據(jù)同品種熱原檢查的劑量推算出來(lái)的，造成限值錯(cuò)誤。

  (3)有的品種細(xì)菌內(nèi)毒素限值從國(guó)外藥典抄來(lái)，沒(méi)有考慮該品種國(guó)內(nèi)上市的臨床使用劑量及中國(guó)人與國(guó)外人均體重等的差異，也造成限值確定不正確。

  (4)錯(cuò)誤的計(jì)算日給藥劑量(一日內(nèi)多次給藥)。

  (5)在品種規(guī)格(濃度)發(fā)生變化時(shí)，計(jì)算MVD沒(méi)有進(jìn)行調(diào)整。

  (6)建立方法時(shí)所用的大給藥劑量已經(jīng)超出了臨床所用劑量等