接種是微生物技術(shù)中基本的操作之一，接種技術(shù)在微生物的分離純化、生理生化等試驗(yàn)中都非常重要。由于接種的目的不同，所采用的接種方式也不同，接種可分成斜面接種、穿刺接種和三點(diǎn)接種等。選擇正確的接種方法，對(duì)于微生物的分離、純化、增殖和鑒別都有重要作用。因接種方法的不同，常常采用不同的接種工具，如接種環(huán)、接種針、移液管和涂布棒等。

在接種過(guò)程中，必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作無(wú)菌操作一般是在無(wú)菌室或接種箱內(nèi)進(jìn)行，并靠近煤氣燈（或酒精燈，一般用酒精噴燈）的火焰操作。有條件的也可在超凈工作臺(tái)上操作。

微生物三點(diǎn)接種法：三點(diǎn)接種是為了獲得單菌落所使用的方法之一，它是在培養(yǎng)皿上接種，即用接種針蘸取少量霉菌孢子，在澆有瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿（俗稱平板）上，以等邊三角形的三點(diǎn)輕輕點(diǎn)一點(diǎn)，培養(yǎng)后即在此三點(diǎn)上長(zhǎng)出菌落。其優(yōu)點(diǎn)是:同種菌落有三個(gè)重復(fù)，同時(shí)在菌落彼此相接近的邊緣常留有一條狹窄的空白地帶此處菌絲生長(zhǎng)稀疏，較透明，還分化出典型子實(shí)體，因此可以直接把培養(yǎng)皿放在低倍鏡下觀察，便于根據(jù)形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行菌種的鑒定。具體操作如下

步驟一，倒平板，將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基放在水浴鍋上加熱熔化，待冷卻至45℃（手握不覺(jué)太燙為宜）后，用無(wú)菌操作法倒平板。

步驟二，標(biāo)明三點(diǎn)位置，待平板凝固后，在培養(yǎng)皿底部注明菌種、日期等，并以等邊三角形的三個(gè)頂點(diǎn)標(biāo)上記號(hào)。

步驟三，右手拿接種針，先在火焰上燒紅滅菌并在平板培養(yǎng)基的邊緣冷卻且蘸濕。

步驟四，蘸取孢子，將滅過(guò)菌而且蘸濕的接種針伸入菌種管，用針尖蘸取少量霉菌孢子。

步驟五，點(diǎn)接，以垂直法或水平法把接種針上的孢子點(diǎn)到預(yù)先標(biāo)記好的部位，注意切勿刺破培養(yǎng)基。

將培養(yǎng)皿倒置，于28℃恒溫條件下培養(yǎng)，48h后觀察生長(zhǎng)情況。

在接種的過(guò)程中需要注意哪些問(wèn)題呢？

（1）接種室應(yīng)保持清潔，用煤粉酚皂液擦洗臺(tái)面及墻壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均應(yīng)用紫外燈滅菌。定期對(duì)接種室作無(wú)菌程度的檢查。

（2）進(jìn)入接種室前，應(yīng)先做好個(gè)人衛(wèi)生工作，在緩沖間內(nèi)要換工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只準(zhǔn)在接種室內(nèi)使用。不準(zhǔn)穿到其它地方去，并要定期換、消毒。

（3）接種的試管、三角并瓶等應(yīng)做好標(biāo)記，注明培養(yǎng)基、菌種的名稱、日期。移入接種室內(nèi)的所有物品，均須在緩沖室用70%酒精擦試干凈。

（4）接種前，雙手用70%酒精或新潔爾消毒，操作過(guò)程不離開(kāi)酒精燈火焰；棉塞不亂放；接種工具使用前后均需火焰滅菌。

（5）恒溫培養(yǎng)箱應(yīng)經(jīng)常清潔消毒。