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細胞因子ELISA試劑盒在處理和保存方面需考慮那些問題

發(fā)布時間:2023-01-10瀏覽次數:916返回列表

  細胞因子ELISA試劑盒在處理和保存方面需考慮那些問題


  一、血清標本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。

  二、標本在保存中如呈現細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。

  三、要注意防止呈現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因此,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,然后與后面加入的HRP底物反響顯色。

  四、冰凍保存的血清標本須注意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生破壞效果,然后引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。

  五、細胞因子ELISA試劑盒,樣本的采集及血清別離中要注意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性干擾。

  ELISA檢測試劑盒有哪些免疫測定:

  ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。

  加標本一般用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標本應換吸嘴,避免發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保 證混和。加酶結合物使用液和底物使用液時可用定量多道加液器,使加液進程迅速完結。

  在ELISA檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶結合物后??乖贵w反響的完結需要有一定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當。

  ELISA屬固相,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其中的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時機,只要貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐漸平衡的進程,因而需經分散,才干到達反響的結尾。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這便是為什么ELISA反響總是需要一定時刻的溫育。

  溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃(冰箱溫度)等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度。在建立ELISA方法作反響動力學研究時,試驗表明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經1-2小時,ELISA檢測試劑盒產物的生成可達高峰。為加速反響,可進步反響的溫度。

  有些試驗在43℃進行,但不宜采用高的溫度。抗原抗體反響4℃為*,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中,以構成多的沉積。但因所需時刻太長,在ELISA中一般不予采用。

  ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。