ECC選擇性顯色培養(yǎng)基實驗原理

  原理

  HiCrome ECC顯色培養(yǎng)基使用了HiVeg特別蛋白胨替代動物源特別蛋白胨，使得培養(yǎng)基無BSE/TSE風(fēng)險。該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，用于初步鑒定來自食品和環(huán)境樣品的大腸桿菌和其他大腸菌群

  培養(yǎng)基含兩種顯色原。一種被大腸埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解，產(chǎn)生藍(lán)色至紫色菌落，另一種被大腸菌群的半乳糖苷酶裂解，產(chǎn)生玫瑰紅-粉色菌落(1,2)。HiVeg特別蛋白胨和酵母粉提供氮源物質(zhì)、維生素B和其他必要生長營養(yǎng)素。乳糖提供可發(fā)酵的碳水化合物，中性紅為pH指示劑。磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀為培養(yǎng)基的緩沖液。氯化鈉有助于維持滲透壓平衡。

  使用前使培養(yǎng)基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(貨號MV028)進(jìn)行1:5或1:10稀釋食品樣品并進(jìn)行樣品勻漿。將勻漿液0.5ml或1ml用無菌玻璃涂布棒涂布在瓊脂表面并在35-37°C孵育18-24小時。孵育結(jié)束后對藍(lán)/紫菌落進(jìn)行計數(shù)，并乘以稀釋因子。大腸埃希菌的數(shù)目以每g食品為單位報告。

  培養(yǎng)基組成    成分    克/升

  HiVeg特殊蛋白胨  5.00

  酵母粉  3.30

  乳糖  2.50

  磷酸氫二鈉  3.50

  磷酸二氫鉀  1.50

  氯化鈉  5.00

  顯色混合劑  20.30

  中性紅  0.03

  瓊脂  15.00

  終 pH (25°C) 6.8±0.2

  配制

  55.83克溶于1000 ml蒸餾水。輕輕加熱使培養(yǎng)基完全溶解。15磅(121℃)高壓滅菌15分鐘。冷卻至50℃。混勻并傾注無菌平皿。培養(yǎng)基可能不透明，不過不影響其性能。

  質(zhì)量控制

  粉末外觀：淡粉色均一自由流動粉末。

  成膠性：結(jié)實，相當(dāng)于1.5%瓊脂糖凝膠。

  制備好的培養(yǎng)基的顏色和透明度：平皿內(nèi)為粉紅色不透明凝膠。

  配比后的pH值：5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后，pH值自動為6.8 ± 0.2(25°C)。

  培養(yǎng)反應(yīng)

  35-37°C培養(yǎng)18-24小時后，觀察培養(yǎng)反應(yīng)

  有機體

  生長

  菌落顏色

  大腸桿菌(ATCC 25922)

  旺盛

  藍(lán)/紫

  肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)

  旺盛

  玫瑰紅/粉紅

  銅綠假單胞菌(ATCC 27853)

  好-旺盛

  稻草色

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