對(duì)于Elisa試劑盒的原理及相關(guān)檢測(cè)方法您了解多少?

  elisa試劑盒介紹

  ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。 Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。

  elisa試劑盒原理

  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay，簡(jiǎn)寫(xiě)ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到?>聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。

  分類(lèi)方法

  夾心法

  夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原，一般的操作步驟為：

  將具有專(zhuān)一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤(pán)上，完成后洗去多余抗體;

  加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的抗原，則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié);

  洗去多余待測(cè)檢體，加入另一種對(duì)抗原專(zhuān)一的一次抗體，與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié);

  洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié);

  洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。

  間接法

  間接法常用于檢測(cè)抗體，一般的操作步驟為：

  將已知的抗原固著于塑膠孔盤(pán)上，完成后洗去多余的抗原;

  加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的一次抗體，則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗原進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié);

  洗去多余待測(cè)檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié);

  洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤(pán)中的吸光值(OD值)，以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。

  競(jìng)爭(zhēng)法

  競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制，一般用于檢測(cè)小分子抗原，其操作步驟為：

  將具有專(zhuān)一性的抗體固著于塑膠孔盤(pán)上，完成后洗去多余抗體;

  加入待測(cè)檢體，使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié);

  加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)，由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結(jié)，即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái);

  洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。

  ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專(zhuān)門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿(mǎn)足客戶(hù)的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶(hù)需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶(hù)滿(mǎn)意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。