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兔ELISA試劑盒的計算方式和正確操作步驟

發(fā)布時間:2023-10-25瀏覽次數(shù):760返回列表

  兔ELISA試劑盒的計算方式和正確操作步驟

  兔ELISA試劑盒計算以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

  兔ELISA試劑盒操作步驟:

  1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

  2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液:稀釋后加入50ul于反應孔內。

  3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育小時。

  4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

  5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

  6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

  7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育0分鐘。避免光照。

  8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

  9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

  兔ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒