本儀器一般都較為昂貴，使用不當(dāng)又易導(dǎo)致?lián)p壞，且再生尤其困難，所以使用、維護(hù)與保養(yǎng)均需特別慎重。本文主要介紹手性柱使用時(shí)需要特別注意的一些問題。

1、將色譜柱接到色譜儀器之前，必須先用合適的溶劑沖洗流路（包括六通閥和定量環(huán)）。杜流路中殘存丙酮、氯仿、DMF（二甲基甲酰胺）、DMSO（二甲基亞砜）、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF（四氫呋喃）等，以防止破壞手性固定相。如果在進(jìn)樣檢測，進(jìn)樣間隔的洗針液必須更換成合適的溶劑，是15%～20%的異丙醇溶液。然后連接好色譜柱，不接檢測器，用純水以0.5ml/min流速?zèng)_洗約20min。（注意：流速需小間隔從0升至0.5ml/min）

2、手性柱保存時(shí)，必需保證柱內(nèi)無緩沖鹽或其他鹽類物質(zhì)殘存。

3、樣品檢測前需仔細(xì)詢問送樣人員樣品中可能含有的溶劑，如果工藝中用到丙酮、氯仿、DMF、二甲基亞砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF，則需盡量烘干。樣品盡量溶解在流動(dòng)相中，并用0.45μm濾膜過濾。不能使用強(qiáng)堿性物質(zhì)作為流動(dòng)相添加劑或者溶解樣品，因?yàn)檫@樣會損壞填料中的硅膠成分。 

4、連接檢測器，再用純水以0.5ml/min流速?zèng)_洗約120min。

5、提倡在室溫下使用，但一般要求柱溫不超過25℃。

6、用15%以內(nèi)的異丙醇溶液以0.5ml/min流速?zèng)_洗約60min。

7、要特別注意流動(dòng)相及樣品溶解溶液的pH值，佳pH范圍為4.0～7.0，切不可超過10.0，以防止硅膠溶解而損壞填料，所以pH不要超過8.0。否則，易導(dǎo)致手性分離不佳、色譜峰嚴(yán)重變寬、色譜峰拖尾及分叉等。強(qiáng)堿性溶液的導(dǎo)入，尤其容易導(dǎo)致手性柱不可逆損壞，無再生可能而徹底報(bào)廢！

8、再用純水以0.5ml/min流速?zèng)_洗約60min。

9、用流動(dòng)相以不超過0.8ml/min流速平衡約1h直至基線平穩(wěn)，進(jìn)樣檢測。

10、如果系統(tǒng)中或者色譜柱中含較高濃度的異丙醇或者乙醇時(shí)，由于他們的粘度比較大，平衡色譜柱時(shí)需特別注意壓力變化，可采用低流速平衡，當(dāng)柱壓下降后再逐漸升高至要求的流速。  （3）樣品檢測完畢，用無水乙醇清洗色譜柱，以0.5ml/min沖洗3個(gè)小時(shí)。用無水乙醇柱壓會比較高，所以流速不能過高，沖洗過程中注意壓力變化，如超過50bar，則把流速降至0.3ml/min，并適當(dāng)延長沖洗時(shí)間

注：手性柱在使用過多次且正常后，可將時(shí)間適當(dāng)縮短