手性柱是由具有光學(xué)活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引入手性環(huán)境使對映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異，從而達(dá)到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。要實(shí)現(xiàn)手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結(jié)果。這些相互作用通過影響包埋復(fù)合物的形成，特殊位點(diǎn)與分析物的鍵合等而改變手性分離結(jié)果。由于這種作用力較微弱，因此需要仔細(xì)調(diào)節(jié)、優(yōu)化流動相和溫度以達(dá)到zui佳分離效果。如何選擇一根屬于你的手性柱?

    根據(jù)三點(diǎn)相互作用模型（ Three-point Interaction Model ），手性化合物能夠被拆分，需要有三個(gè)能夠與構(gòu)型相關(guān)的作用位點(diǎn)，這樣的作用力包括氫鍵作用、偶-偶作用、π-π作用、離子間的靜電作用、疏水作用等。

    大環(huán)糖肽抗生素中，存在不同的功能基團(tuán)和特異的結(jié)構(gòu)，以及由多個(gè)手性中心產(chǎn)生的選擇性，為發(fā)生對映選擇性的結(jié)合提供了多種潛在的可能性，而這個(gè)性質(zhì)也是許多原料藥物分子對應(yīng)選擇性的來源。當(dāng)然，每種固定相的空間結(jié)構(gòu)都是特異的，因此其手性識別專屬性都很強(qiáng)，比如應(yīng)用zui廣的 Chiral-V（萬古霉素）和 Chiral-T（替考拉寧）固定相中，雖然都存在羥基、苯環(huán)、羧基、氨基、糖環(huán)等官能基團(tuán)，但由于結(jié)構(gòu)和位置的差異，造成其兩種固定相手性識別位點(diǎn)不盡相同，相互之間還可能形成互補(bǔ)。

    大環(huán)抗生素手性固定相的應(yīng)用非常廣泛，對中性溶質(zhì)、酰胺、酯和胺（包括氨基醇和環(huán)胺）以及性很強(qiáng)的氨基酸都用對映識別的能力。通常可以在反相、性-有機(jī)溶劑模式下就能夠完成手性拆分。

    在制藥行業(yè)中，藥物分子超過 70% 的化合物為堿性。對于堿性化合物的手性拆分，推薦使用 Chiral-V 的色譜柱進(jìn)行拆分。當(dāng)然，如果手性中心連接有伯氨基團(tuán)，則可先采用環(huán)果聚糖衍生物的 Chiral-CF 固定相進(jìn)行拆分。若 Chiral-CF 嘗試的體系下無效，在 Chiral-V 柱中進(jìn)行更多的方法篩選。

    對于常見的 D-,L-氨基酸的拆分，在很多情況下，Chiral-T 柱是方法的選，可以在反相體系下進(jìn)行優(yōu)化。檢測器可以采用 ELSD 或在 MSD 。

    對于 T-boc（叔丁氧羰）保護(hù)的氨基酸，或者手性中心連接的基團(tuán)含有羥基等性基團(tuán)時(shí)，也可以嘗試使用 Chiral-CD 柱在反相體系下進(jìn)行嘗試。因此β環(huán)糊精的手性固定相 Chiral-CD 色譜柱也是一種通用性很強(qiáng)的色譜柱。

    在進(jìn)行手性分析方法的開發(fā)時(shí)，由于化合物結(jié)構(gòu)細(xì)微的差異，可能需要對固定相或流動相進(jìn)行調(diào)整。同時(shí)，為了與檢測器匹配（比如質(zhì)譜），以及提高儀器系統(tǒng)的兼容性（如反相），建議在日常手性方法開發(fā)中，配制 Poroshell 四種手性固定相，組建實(shí)驗(yàn)室手性分析方法開發(fā)平臺，可以完成完成大部分手性化合物的手性拆分工作。