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Annexin V流式檢測細胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法

發(fā)布時間:2022-10-16瀏覽次數(shù):1173返回列表

Jurkat細胞用1μM喜樹堿(Camptothecin) ()或未加藥 ()處理4h,F(xiàn)ITC-Annexin V/PI熒光雙染細胞凋亡檢測試劑盒染色后,流式細胞儀熒光檢測。

Annexin V-FITC單陽性細胞為早期凋亡細胞,Annexin V-FITCPI染色雙陽性的細胞為壞死細胞或者晚期凋亡。PI單染色陽性位裸核細胞。

實測數(shù)據(jù)可能會因細胞類型、細胞凋亡情況,檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

流式檢測細胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:

1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設(shè)置成對數(shù)坐標軸模式備用;

2) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),選取雙陰細胞群;

3) 在雙陰細胞門中,將橫軸和縱軸分別設(shè)成FCSSSC,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細胞碎片,劃出碎片門,應用于所有細胞;

4) 在所有細胞中,反選碎片門,得到所有細胞;

5) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道,參照未經(jīng)藥物處理的對照組,劃出十字門,確定不同群細胞的比例。