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PCR擴(kuò)增儀擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)檢污染問題
發(fā)布時(shí)間：2016-08-08瀏覽次數(shù)：1909返回列表
PCR擴(kuò)增儀擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)檢污染問題
衛(wèi)生部為臨床PCR擴(kuò)增儀實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的要求是分為：
1）試劑準(zhǔn)備區(qū)；
2）標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)；
3）PCR擴(kuò)增區(qū)；
4）產(chǎn)物分析區(qū)。各工作區(qū)要有一定的隔離，操作器材專用，人員進(jìn)出有緩沖間，器材傳遞的方向性也按上述順序進(jìn)行。切不可將擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)的產(chǎn)物及器材拿到其它兩個(gè)工作區(qū)。
PCR擴(kuò)增儀常見的污染包括：
1）模板污染在核酸提取過程中，由于標(biāo)本的容器污染、容器外粘有標(biāo)本、移液器污染和試劑污染等因素造成標(biāo)本被污染。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常常采用克隆質(zhì)粒作為陽性對(duì)照，由于克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量很高，且在活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒具有很強(qiáng)的生命力，實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒的污染也很常見。
2）PCR擴(kuò)增儀產(chǎn)物污染 PCR產(chǎn)物拷貝量很大（一般為10的13次方拷貝/ml),而PCR檢測(cè)僅需數(shù)個(gè)拷貝就可以擴(kuò)增陽性,所以微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。其中可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染。
