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簡述梯度PCR儀的適用范圍與使用要點
發(fā)布時間:2017-08-30瀏覽次數(shù):2176返回列表
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴(kuò)增儀。PCR反應(yīng)能否成功,退火溫度是關(guān)鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在范圍內(nèi)按照梯度設(shè)置,根據(jù)結(jié)果,一步就可以摸索出適反應(yīng)條件。一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴(kuò)增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣可節(jié)省試驗時間、提高實驗效率,又節(jié)約實驗成本。是用來選擇PCR 反應(yīng)適退火溫度方便、有效的方法。梯度范圍選擇在50℃~70℃范圍內(nèi),一般一次PCR 即可選擇出PCR 的適退火溫度。下面,我們來簡單介紹一下此儀器的適用范圍與使用要點。
一、適用范圍
梯度PCR儀適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PicymeraseChainReaction,PCR)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。
二、使用要點
1、建議PCR反應(yīng)結(jié)束后,取出樣品,不要過夜4℃保存樣品。
2、本儀器可在 5℃-40℃的環(huán)境下使用,適環(huán)境溫度為 15℃-30℃,嚴(yán)禁在低于 5℃的環(huán)境下開機(jī)。環(huán)境濕度范圍為 20-80%。
3、該儀器后面有通風(fēng)口,為保持通風(fēng)口的通暢,后兩端必須離開墻壁 10-15cm,不要在儀器的周圍堆放雜物。
注:梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。