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雞抗非洲豬瘟病毒抗體檢測

發(fā)布時間:2019-06-24瀏覽次數(shù):1966返回列表

    由于市場上沒有銷售雞抗豬抗體檢測試劑盒,所以實驗室只有自建ELISA檢測方法,通過對包被液、封閉液、待檢樣品濃度、酶標抗體濃度、顯色時間等條件的摸索,確定佳條件,同時做了特異性檢測。確定判定標準為OD450nm≧0.826時判定為陽性。
    步驟:
    1、全病毒用包被液稀釋以佳濃度包被酶標板,100uL/孔,4℃過夜。
    2、拿出包被的酶標板回復室溫,棄包被液,280uL/孔 PBST洗滌3次,每次3min,拍干。
    3、加入合適的封閉液,100uL/孔,37℃封閉1h,拍干。
    4、待檢測樣品用抗體液稀釋到佳濃度,100uL/孔,37℃孵育1h,洗滌3次,拍干。
    5、HRP-兔抗雞 二抗,用抗體稀釋液按佳濃度稀釋,100uL/孔,37℃孵育45min,洗滌3次,拍干。
    6、用TMB顯色試劑盒,按說明依次加入溶液A,溶液B,室溫避光反應。









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