1.實驗目的

基因組DNA的制備是基因分析的前提。 本實驗要求掌握基因組DNA提取的基本方法。實驗原理 DNA在生物體內(nèi)是與蛋白質(zhì)形成復合物的形式存在的。核酸與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合力包括離子鍵、氫鍵、范德華力等，破壞或降低這些結(jié)合力就可把核酸與蛋白分開。 DNA、RNA所含有的嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)的共軛雙鍵具有吸收紫外光的性質(zhì)，吸收高峰在260nm處，所以，可用紫外分光光度法測定DNA的濃度。

2.基因組DNA提取試劑盒：

在高鹽的狀態(tài)下，DNA純化樹脂專一性地吸附DNA；而在低鹽或水溶液狀態(tài)下，DNA被洗脫下來。

1.實驗目的

本實驗以所提出的全血基因組DNA為模板，以線粒體基因上一段核苷酸為引物，擴增出924bp的擴增產(chǎn)物。學習并掌握PCR反應的基本原理與實驗技術(shù)。實驗原理 多聚酶鏈反應技術(shù)的原理類似于DNA的天然復制過程。

2.可簡述為： 在微量離心管中加入適量緩沖液，加入微量模板DNA，四種脫氧核苷酸，和耐熱Taq聚合酶及兩個合成的DNA引物，并有Mg2+存在。 加熱使模板DNA在高溫下變性，雙鏈解鏈，這是所謂變性階段。 降低溶液溫度，使合成引物在低溫與模板DNA互補退火形成部分雙鏈，這是所謂退火階段。 溶液反應溫度升至中溫，在Taq酶作用下，以四種dNTP為原料，引物為復制起點，模板DNA的一條雙鏈在解鏈和退火之后延伸為兩條雙鏈，這是延伸階段。

1.PCR儀基因擴增儀需要定期檢測，視制冷方式而定一般半年至少一次。

2.PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不一致的，當檢測發(fā)現(xiàn)各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1—2℃時，可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。

3.當然PCR反應過程的關(guān)鍵是升、降溫過程的時間控制，要求越短越好，當PCR儀的降溫過程超過60s，就應該檢查儀器的制冷系統(tǒng)，對風冷制冷的PCR儀要較徹底地清理反應底座的灰塵；對其他制冷系統(tǒng)應檢查相關(guān)的制冷部件。