1.1 研究對象

前瞻性收集 2017 年 1 月 -2017 年 12 月吉林大學(xué)一醫(yī)院收治的原發(fā)性肝癌患者臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn) ： 原發(fā)性肝癌（確診依據(jù)為病理診斷） ； 有手術(shù)適應(yīng)證，可行手術(shù)治療 ； 年齡 18 ～ 75 歲 ； 同意參與本研究，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn) ： 合并其他惡性腫瘤 ； 復(fù)發(fā)性肝癌 ； 肝、腎、心、腦、肺等重要臟器功能不全； 感染性疾??； 血液系統(tǒng)疾?。?凝血功能障礙；術(shù)前接受新輔助化療等特殊治療 ； 3 個月內(nèi)曾使用免疫調(diào)節(jié)劑； 免疫功能不全 ； 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，不宜行手術(shù)治療的晚期肝癌患者。研究期間共納入原發(fā)性肝癌患者109 例，根據(jù)CD44 基因 rs4756195 位點單核苷酸多態(tài)性，將患者分為 AA 組、AG 組和 GG 組，分別為 67、23 和 19 例。
1.2 觀察指標(biāo)
主要觀察指標(biāo)為腫瘤組織中 CD4+ T 細(xì)胞、CD8 +T 細(xì)胞、Treg 細(xì)胞、Th17 細(xì)胞。次要觀察指標(biāo)為白介素 -2 （interleukin-2, IL-2） 、 白介素 -10 （interleukin-10,IL-10） 、腫瘤生長因子 -β（tumor growth factor-β,TGF-β）和白介素 -17（interleukin-17, IL-17） 。
1.3 方法
1.3.1流式細(xì)胞術(shù)
術(shù)中留取原發(fā)性肝癌組織標(biāo)本（距離肝癌邊緣 >1 cm 的肝癌組織） ，使用流式細(xì)胞儀（美國 Beckman coulter 公司 Epics XL 型） 檢測 CD4+ T、CD8+ T、Treg 及 Th17 細(xì)胞。
1.3.2免疫組織化學(xué)法
采用免疫組織化學(xué)法檢測IL-2、IL-10、TGF-β 和 IL-17，相關(guān)單克隆抗體均購自美國 Santa Cruz 公司，抗體比例 1 ∶ 80。陽性判定標(biāo)準(zhǔn) ：根據(jù)染色強度和陽性細(xì)胞百分比計算，其中不著色、淺黃色、棕黃色、黃褐色分別為0、1、2 和 3 分， 陽性細(xì)胞數(shù)為 <10%、10% ～ <40%、40% ～ <70%、≥ 70% 分別計 0、1、2 和 3 分，兩者之和為總分， 總分≥ 2 分為陽性， <2 分為陰性。