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價格:電議
所在地:上海
型號:50次
更新時間:2021-08-16
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公司地址:上海市漕寶路66號20F
劉小姐(女士)
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)第三代免提核酸提取病毒采運試劑盒Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準曲線定量的方法。
外標(biāo)準曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性最定量方法,已得到全世界的公認,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
【技術(shù)保護點】
1.一種實時熒光定量PCR檢測EB病毒C/D基因基因分型試劑盒,其特征在于,由定量PCR反應(yīng)液(1)、C型標(biāo)準品(2)、D型標(biāo)準品(3)、陽性對照品(4)、陰性對照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作說明書(7)、盒體(8)、盒蓋(9)組成,其中定量PCR反應(yīng)液(1)含有PCR緩沖液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型熒光探針、D型熒光探針、Taq DNA聚合酶,上游引物序列為:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列為:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型熒光探針為:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型熒光探針為:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
下面是公司正在打折促銷產(chǎn)品:
CCL12-8℃ for 6 mo
人肺癌細胞,A549細胞Sandwich ELISA, Double AntibodyCCL12-8℃ for 6 mo
人肺癌細胞,A549細胞 4-氨基-L-苯丙氨酸
骨成型蛋白質(zhì)受體II(BMP RII)2-8℃ for 6 mo
人肺癌細胞,NCI-H2126細胞Sandwich ELISA, Double Antibody骨成型蛋白質(zhì)受體II(BMP RII)2-8℃ for 6 mo
E-鈣粘附分子(E-Cadherin)2-8℃ for 6 months用于Illumina平臺的Small RNA-Seq Library Prep Kit試劑盒
人肺癌細胞,Calu-1細胞Sandwich ELISA, Double AntibodyE-鈣粘附分子(E-Cadherin)2-8℃ for 6 months用于Illumina平臺的Small RNA-Seq Library Prep Kit試劑盒
人肺癌細胞,Calu-1細胞 2-硝基-4-異丙基甲苯
人肺癌細胞,NCI-H2126細胞 茴香酸乙酯
第三代免提核酸提取病毒采運試劑盒0.188ng/ml大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試盒Prepro-TRH (178-199)
9.375pg/ml大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試盒TRH, Thyroliberin
2.344pg/ml大鼠腎素(Renin)ELISA試盒 TRH (free acid)
2.344pg/ml大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試盒 (Glu2)-TRH
0.094ng/ml大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試盒(Phe2)-TRH
0.188ng/ml大鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試盒Secretin (rat)
46.9pg/ml大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試盒Suc-AAPD -pNA
9.375pg/ml大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試盒Suc-AAPD-pNA
37.5pg/ml大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試盒 Suc-AAPE-pNA
9.375pg/ml大鼠蛋白酶(PP)ELISA試盒 Suc-AAPI-pNA
內(nèi)標(biāo)對熒光定量PCR的影響:
1.實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準曲線獲得定量結(jié)果。因此,無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)第三代免提核酸提取病毒采運試劑盒Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準曲線定量的方法。
2.內(nèi)標(biāo)對實時熒光定量PCR的影響若在待測樣品中加入已知起始拷貝數(shù)的內(nèi)標(biāo),則PCR反應(yīng)變?yōu)殡p重PCR,雙重PCR反應(yīng)中存在兩種模板之間的干擾和競爭,尤其當(dāng)兩種模板的起始拷貝數(shù)相差比較大時,這種競爭會表現(xiàn)得更為顯著。但由于待測樣品的起始拷貝數(shù)是未知的,所以無法加入合適數(shù)量的已知模板作為內(nèi)標(biāo)。也正是這個原因,傳統(tǒng)定量方法雖然加入內(nèi)標(biāo),但仍然只是一種半定量的方法。