SY0537 膠原酶III型

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特別提示：包括膠原酶III型在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：膠原酶III型
英文名稱：Collagenase III
產(chǎn)品貨號(hào)：SY0537
產(chǎn)品規(guī)格：100mg

本品為III型膠原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺細(xì)胞和胎兒細(xì)胞的制備。

本品來(lái)源于溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），是一種酶粗提物，不僅含有膠原酶（更準(zhǔn)確的稱法為梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分別能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白，多糖和脂質(zhì)，使得本品非常適用于組織消化。

膠原酶（Collagenase）是一種蛋白酶，一種肽鏈內(nèi)切酶，能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中，很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中）并切割該序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽，但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶，這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。

目前商業(yè)化提供的細(xì)菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異，分為四種類型：膠原酶I型，II型，III型和IV型，在應(yīng)用上有所偏向：
1）膠原酶I（Type I Collagenase）：含有比較均勻的各種酶活力（包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備；
2）膠原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來(lái)源細(xì)胞的制備；
3）膠原酶III（Type III Collagenase）：含有較低的蛋白酶活性，常用于乳腺細(xì)胞的制備；
4）膠原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰島細(xì)胞的制備，或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。

分子量：68-130 kDa
激活劑：Ca2+、Zn2+
抑制劑：EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum
活力單位：在37℃，pH7.5 的條件下，5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當(dāng)于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。
儲(chǔ)存條件：4℃避光，有效期兩年

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
SY0532	淋巴細(xì)胞分離液1.077	100ml|5×100ml
HR8172	紅細(xì)胞裂解液	100ml
HR8176	細(xì)胞懸液制備試劑盒	100ml
BTN120895	大鼠白細(xì)胞分離液	200mL
BTN120891	大鼠胰島細(xì)胞分離液	200mL
BTN120902	人NK細(xì)胞分離液	200mL

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名稱：淋巴細(xì)胞分離液1.084
貨號(hào)：SY0533
規(guī)格：100ml
淋巴細(xì)胞分離液（Lymphocyte Separation Medium 1.084，簡(jiǎn)稱LSM-1.084）是一種無(wú)菌的即用型分離液，基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過(guò)一些改良，使得操作簡(jiǎn)單快速且分離效率更高。本品是無(wú)菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸鈉混合溶液，密度為1.084 g/ml，內(nèi)毒素含量很低（＜0.12 EU/ml），是在嚴(yán)格控制的環(huán)境下加工生產(chǎn)的，生產(chǎn)條件符合ISO13485:2003標(biāo)準(zhǔn)和GMP認(rèn)證。相對(duì)于密度為1.077 g/ml的人淋巴細(xì)胞分離液，本品適用于分離更高密度的人單個(gè)核細(xì)胞，包括外周血，臍帶血以及骨髓瘤來(lái)源的組織樣本。還適用于分離大小鼠血細(xì)胞，正因?yàn)閲X動(dòng)物的淋巴細(xì)胞密度稍高于人淋巴細(xì)胞。

工作原理
去纖維蛋白或抗凝人血以1：1的比例用無(wú)菌生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，小心的添加在分離液上層（不要混雜在一起），之后離心30-40min。離心過(guò)程中，差速遷移使其zuì終形成幾個(gè)不同的細(xì)胞分層：
①聚集在管底的顆粒主要是Ficoll 聚集的紅細(xì)胞以及沉淀物；
②緊挨著上面一層的顆粒主要是粒細(xì)胞，其處于LSM-1.084溶液的滲透壓臨界，具有足夠高的密度遷移穿過(guò)LSM-1.084溶液層。
③單個(gè)核細(xì)胞分布在血漿和LSM-1.084分離液的中間層，還包括一些沉降系數(shù)低（密度低）的顆粒，如血小板。

淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞和血小板不具有足夠高的密度穿透LSM-1.084分離液層，因此這些細(xì)胞在血漿和LSM-1.084分離液層聚集形成一個(gè)中間分層。吸取中間層，用平衡鹽溶液短暫洗滌，以除去血小板，細(xì)胞分離介質(zhì)和血漿，就可以單個(gè)核細(xì)胞。通常情況下，分離所得的細(xì)胞中95±5%為單個(gè)核細(xì)胞，細(xì)胞存活率＞90%，回收率為60±20%。

儲(chǔ)存條件：4～8℃，避光

名稱：細(xì)胞消化液
貨號(hào)：SY0534
規(guī)格：100ml
本品為即用型的無(wú)菌產(chǎn)品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5mM EDTA和3mg/L酚紅），比活力≥200 u/ml，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

本品是包含有蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿和粘附培養(yǎng)器皿中消化細(xì)胞。適用于組織解離和細(xì)胞分離，因分離后的細(xì)胞能保持完好的表面抗原，且不含任何動(dòng)物動(dòng)物或者細(xì)菌來(lái)源組分，可滿足對(duì)后續(xù)如細(xì)胞表面標(biāo)記、病毒生長(zhǎng)分析、流式細(xì)胞分析以及生物反應(yīng)器相關(guān)檢測(cè)等多種實(shí)驗(yàn)的要求。與傳統(tǒng)的胰酶消化液相比，本品具有以下：
1）適用于大多數(shù)原代細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的消化，以及昆蟲(chóng)細(xì)胞；
2）溫和有效的消化干細(xì)胞（hESCs和mESCs），凍存后細(xì)胞具更高復(fù)蘇率；
3）幾分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)粘附細(xì)胞的分離，不需清洗或中和反應(yīng)，節(jié)省細(xì)胞傳代時(shí)間；
4）對(duì)細(xì)胞消化較為溫和，能增加細(xì)胞產(chǎn)量和存活率，增強(qiáng)細(xì)胞貼壁效率，改善細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞生長(zhǎng)特性等。

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期兩年

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